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FITC标记ASF,fitc-ASF,异硫氰酸荧光素标记白蛋白融合蛋白

时间:2026-01-29    阅读:10    点赞:0

FITC标记ASF(fitc-ASF)是将异硫氰酸荧光素(FITC)与白蛋白融合蛋白(ASF)通过特异性偶联形成的荧光探针,兼具ASF的生物相容性、靶向性与FITC的高灵敏荧光特性,核心用于蛋白质递送追踪、靶向治疗评估、生物分布研究等领域,为生物药物研发、药物递送系统优化提供可视化工具。

ASF作为白蛋白衍生融合蛋白,具有生物相容性好、半衰期长、可靶向肿瘤组织(通过EPR效应)等优势,是理想的药物载体与生物探针骨架,FITC标记后可实现对ASF在体内外的动态追踪。

FITC作为常用绿色荧光染料,具备荧光信号强、水溶性优异、偶联效率高、细胞毒性低等核心特性,其与ASF的偶联通过FITC的异硫氰酸基团与ASF分子上的游离氨基反应,形成稳定的硫脲键,反应条件温和(室温、pH 8.2-8.5),不会破坏ASF的天然构象、靶向活性及生物相容性。标记后的FITC-ASF荧光信号稳定,可通过荧光显微镜、流式细胞仪、活体成像系统等设备,精准追踪ASF的细胞摄取过程、组织分布规律及代谢路径,解决了传统ASF研究中无法实时可视化监测的难题。

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该探针的应用场景聚焦生物药物研发与递送系统评估:在靶向药物递送研究中,ASF可作为载体负载化疗药物、核酸药物等,FITC-ASF可用于评估载体对肿瘤组织的靶向富集能力、细胞内递送效率及药物释放情况,直观验证EPR效应介导的肿瘤靶向性,为优化载体结构、提升递送效率提供数据支撑;蛋白质代谢研究中,可追踪ASF在体内的吸收、分布、代谢、排泄(ADME)过程,量化其在肝、肾、肿瘤等组织的富集量与半衰期,为评估ASF作为药物载体的生物利用度提供依据。在细胞实验中,可用于观察不同细胞系对ASF的摄取效率差异,筛选靶向性细胞模型;在动物实验中,可通过活体成像实时监测ASF在小鼠、大鼠等模型体内的动态分布,评估其在肿瘤部位的滞留时间与靶向效果。

使用与储存需遵循严格规范:FITC-ASF应密封保存在-20℃避光环境,加入蛋白酶抑制剂防止蛋白降解,避免反复冻融(建议分装为单次用量)。配制溶液时需使用无菌无酶PBS缓冲液,调节pH至7.2-7.4,浓度根据实验需求控制在0.1-5mg/mL,细胞实验中常规孵育浓度为10-100μg/mL,活体实验中小鼠尾静脉注射剂量为1-5mg/kg。偶联反应完成后,需通过透析或凝胶过滤去除未反应的游离FITC,降低背景荧光干扰;细胞实验中需设置FITC空白对照组、未标记ASF对照组,排除非特异性结合与荧光干扰。用于活体成像时,建议在注射后不同时间点(1h、6h、24h、48h)进行成像,追踪ASF的动态分布规律。FITC-ASF凭借优异的生物相容性与可视化能力,成为生物药物递送与靶向治疗研究的核心工具,助力相关领域的研发创新。

以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证,限参考。我方仅提供相关产品,不参与保证任何实验,具体应用还需参考相关实验设计及文章!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)   


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