近红外染料标记人血清白蛋白（ICG-HSA）
近红外染料标记人血清白蛋白（ICG-HSA）是由吲哚菁绿（ICG）与人体血清白蛋白（HSA）通过共价偶联形成的复合生物材料，凭借优异的近红外成像性能、生物相容性及靶向潜力，成为临床前研究与转化医学领域的热点材料。
ICG作为唯一被美国FDA批准用于临床的近红外荧光染料，激发波长约780nm，发射波长约820nm，在近红外光区具有良好的组织穿透性，可穿透5-10cm的生物组织，且荧光信号不易受生物体内血红蛋白、水等物质的吸收干扰，成像清晰度高；同时ICG代谢速度快，主要通过肝脏代谢、胆汁排泄，在体内无明显蓄积，毒性低。HSA则是人体血浆中含量丰富的蛋白质，占血浆总蛋白的55%-60%，分子量约66.5kDa，具有良好的水溶性、低免疫原性、生物相容性及丰富的功能结合位点，不仅能与多种药物、小分子化合物结合，还可通过修饰实现靶向功能，是理想的药物载体与荧光标记载体。
ICG与HSA的偶联通常采用活性酯法或异氰酸酯法，优先选择HSA分子链上的赖氨酸残基作为结合位点，ICG经活化后与赖氨酸的氨基发生反应，形成稳定的酰胺键或脲键，偶联过程中需严格控制反应条件：pH值维持在8.0-9.0（适宜氨基的亲核反应），温度控制在25-37℃，反应时间2-4小时，同时通过磁力搅拌保证反应均匀。为提高标记效率与产物纯度，反应体系中ICG与HSA的摩尔比通常控制在5:1-10:1，反应结束后采用凝胶过滤层析（Sephadex G-25或G-50）去除游离ICG，再经透析纯化24-48小时，最终产物纯度可达到98%以上，通过紫外-可见分光光度计可验证偶联效果，在780nm（ICG特征峰）与280nm（HSA特征峰）处均出现明显吸收峰，表明偶联成功。
该材料外观为深绿色粉末或溶液，储存条件需严格把控，固体粉末密封后置于-20℃避光环境，有效期约12个月；溶液型产品需在-80℃避光保存，避免反复冻融。运输过程中需采用冷链运输（4℃），运输时间不超过72小时，防止温度波动影响荧光活性与蛋白稳定性。使用时需根据实验需求制备工作液，固体粉末用无菌生理盐水、PBS缓冲液（pH7.4）或无血清培养基溶解，超声辅助溶解后离心（3000r/min，5分钟）去除不溶物，工作浓度范围为0.01-1mg/mL，具体浓度需结合成像设备灵敏度、实验模型（细胞实验或动物实验）调整。
在应用场景中，ICG-HSA的优势尤为突出：在分子影像学研究中，可作为近红外探针用于活体动物的血液循环追踪、器官灌注评估及淋巴系统成像，借助小动物活体成像系统可清晰观察到探针在体内的动态分布，为血管疾病、淋巴转移等研究提供可视化数据；作为药物载体示踪工具，可将化疗药物、光敏剂等负载于HSA分子上，通过ICG的荧光信号实时监测药物在体内的递送过程、靶向富集效果及代谢情况，优化药物递送系统的设计；在临床前肿瘤研究中，可用于肿瘤组织的术中近红外可视化导航，帮助精准识别肿瘤边界与转移灶，为肿瘤切除手术提供辅助支持；此外，还可用于蛋白-药物相互作用研究、生物膜通透性评估等场景，为药物研发与临床转化提供可靠的数据支撑。使用时需注意：工作液现配现用，避免与重金属离子、强还原剂接触导致荧光淬灭；细胞实验中需无菌操作，避免污染；动物实验中需严格控制给药剂量，遵循动物伦理规范；该材料仅限科研及实验使用，不可用于人体临床诊疗。
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