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生物素标记硫酸软骨素,Biotin-Labeled Chondroitin Sulfate

时间:2026-01-07    阅读:16    点赞:0

生物素标记硫酸软骨素(Biotin-Labeled Chondroitin Sulfate)

一、基础信息表

项目

详情

中文名称

生物素标记硫酸软骨素

英文名称

Biotin-Labeled Chondroitin Sulfate(缩写:Biotin-CS)

别称

生物素偶联硫酸软骨素;维生素 H 标记硫酸软骨素

特征波长

无荧光特性,需结合链霉亲和素 - 荧光素复合物检测

亲和配对

与链霉亲和素(Streptavidin)或亲和素(Avidin)具有高度特异性结合能力


二、产品介绍

生物素(Biotin)又称维生素 H,是一种小分子水溶性维生素,可与链霉亲和素或亲和素发生特异性结合,结合亲和力很强(解离常数 Kd≈10⁻¹⁵ mol/L),且结合反应稳定、快速,不受 pH、温度等环境因素影响。生物素标记硫酸软骨素是通过酰胺化反应将生物素分子共价偶联到硫酸软骨素的氨基或羧基上,形成的生物素化生物材料。该产品保留了硫酸软骨素的生物活性和水溶性,同时引入了生物素的特异性识别位点,标记率可控制在 1%–8%,分子量范围为 10 kDa–300 kDa,可根据实验需求定制。其在生理条件下性质稳定,不易水解,无细胞毒性,生物相容性优异,可与链霉亲和素标记的荧光染料、酶、磁性颗粒等材料特异性结合,实现对硫酸软骨素的定性、定量及定位分析,是生物医学研究中常用的标记工具。


三、使用方法

工作液配制:称取适量 Biotin-CS 粉末,加入无菌 PBS 缓冲液(pH 7.2–7.4),磁力搅拌 30–60 分钟,配制成浓度为 0.5–10 mg/mL 的工作液,4℃保存可稳定 1 周。

细胞结合实验:将 Biotin-CS 工作液与靶细胞共孵育 2–12 小时(37℃、5% CO₂),孵育后用 PBS 洗涤细胞 3 次,去除未结合的生物素化材料。加入链霉亲和素 - FITC(或链霉亲和素 - Cy5)复合物,室温孵育 30 分钟,再次洗涤后,通过荧光显微镜或流式细胞仪观察荧光信号,实现对 Biotin-CS 的间接检测。

体外定性定量检测

酶联免疫吸附实验(ELISA):将 Biotin-CS 包被于酶标板,加入链霉亲和素 - 辣根过氧化物酶(HRP)复合物,室温孵育 1 小时,洗涤后加入底物溶液,通过酶标仪测定吸光度值,结合标准曲线计算 Biotin-CS 的浓度。

亲和层析纯化:将 Biotin-CS 溶液上样至链霉亲和素亲和层析柱,利用生物素 - 链霉亲和素的特异性结合进行纯化,洗脱后收集目标产物,用于后续实验。

体内实验:通过尾静脉注射将 Biotin-CS 溶液导入动物体内,设定时间点取样,将组织或血液样品与链霉亲和素 - 荧光素复合物孵育,利用活体成像系统或组织切片荧光成像观察 Biotin-CS 的体内分布。

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四、用途

靶向药物递送系统构建:利用生物素 - 链霉亲和素的特异性结合,将负载药物的 Biotin-CS 与修饰有链霉亲和素的靶向配体(如抗体、多肽)结合,构建靶向给药系统,提高药物在靶部位的富集效率。

生物分子相互作用研究:用于研究硫酸软骨素与细胞表面受体、蛋白质等生物分子的相互作用,通过间接荧光标记或酶联检测,明确其结合位点和结合亲和力。

生物分离与纯化:作为亲和层析的配体,用于分离和纯化与硫酸软骨素具有特异性结合的蛋白质、酶或细胞,在生物大分子纯化领域具有广泛应用。

体外诊断试剂研发:开发基于 Biotin-CS 的 ELISA 试剂盒,用于检测血液、关节液中的相关标志物,辅助关节炎、骨质疏松等疾病的诊断。 

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