活体生物成像技术是解析生物体内生理病理过程、评估药物作用效果的核心手段，其中荧光成像因具备高灵敏度、实时性和低侵入性等优势，在生命科学研究与临床前评估中占据重要地位。荧光素（FITC）作为经典的荧光染料，具有荧光量子产率高、激发波长适中、标记工艺简便等特点，广泛应用于生物分子可视化研究。透明质酸（HA）作为人体天然存在的线性多糖，拥有优异的生物相容性、生物可降解性及CD44受体靶向识别能力，是理想的生物医用载体骨架。HA-FITC复合物通过化学偶联整合两者优势，兼具靶向富集与荧光示踪功能，但在活体成像中存在光稳定性不足、组织穿透深度有限等问题。因此，优化HA-FITC的成像性能，拓展其在活体生物成像中的应用场景，对推动生物医学基础研究与精准诊疗技术发展具有重要意义。
HA-FITC的成像性能优化需聚焦光稳定性提升与组织穿透能力增强两大核心方向。FITC自身易发生光漂白，在激发光持续照射下荧光强度快速衰减，且在体内复杂环境中易受pH值、离子强度及生物酶影响，导致成像信号失真。针对这一缺陷，可通过分子修饰与载体封装双重策略改善。在分子修饰层面，可在HA-FITC分子链引入聚乙二醇（PEG）形成HA-PEG-FITC复合物，PEG的空间位阻效应能减少FITC与体内蛋白质的非特异性结合，抑制荧光猝灭，同时提升复合物水溶性，延长体内循环时间。在载体封装层面，将HA-FITC包裹于脂质体、聚合物纳米粒等载体中，构建纳米荧光探针，可隔绝外界环境对FITC的侵蚀，显著提升光稳定性。研究表明，纳米封装后的HA-FITC光漂白速率降低40%以上，在活体成像中可实现持续6小时以上的稳定信号监测。
组织穿透深度不足是制约HA-FITC活体成像应用的另一关键瓶颈。FITC的发射波长位于可见光区（515-520nm），易被血红蛋白、黑色素等生物组分吸收散射，难以穿透深层组织。为突破这一限制，可采用荧光共振能量转移（FRET）机制构建复合成像体系，选取近红外荧光分子作为能量供体与HA-FITC偶联，借助近红外光强组织穿透能力的优势，通过能量转移激活FITC荧光，间接实现深层组织成像。此外，调控HA分子量可精准匹配不同成像需求：低分子量HA（＜10kDa）渗透性强，适用于皮肤、黏膜等浅层组织成像；高分子量HA（＞50kDa）循环时间长，可借助肿瘤EPR效应实现深层病灶靶向成像。
HA-FITC在活体生物成像中的应用已覆盖肿瘤监测、炎症追踪、干细胞示踪等多个领域。在肿瘤精准成像中，HA可通过与肿瘤细胞表面高表达的CD44受体特异性结合，实现肿瘤组织主动靶向富集。向荷瘤小鼠尾静脉注射HA-FITC后，通过活体荧光成像系统可清晰观测到荧光信号在肿瘤部位特异性聚集，精准定位肿瘤位置、大小及浸润范围，为肿瘤早期诊断与分期提供直观依据。同时，利用HA-FITC可实时监测肿瘤生长动态及对化疗、免疫治疗的响应情况，为治疗方案优化提供数据支撑。在炎症反应监测中，HA-FITC可借助炎症部位血管通透性增加的特性被动富集，同时通过CD44受体介导的内吞作用进入炎症细胞，增强荧光信号强度。在类风湿关节炎、溃疡性结肠炎等炎症模型中，HA-FITC可实时追踪炎症发展进程，评估*炎药物的作用效果与靶向性。在干细胞治疗领域，HA-FITC标记的干细胞注入体内后，可通过荧光成像实时监测干细胞的分布、迁移与定植过程，为干细胞治疗的安全性与有效性评估提供可视化工具。
尽管HA-FITC成像技术已取得显著进展，仍存在诸多挑战：一是复杂生物环境中荧光信号特异性有待提升，易受非靶向组织非特异性吸附干扰；二是长期活体成像的生物安全性需进一步验证；三是成像设备的灵敏度与分辨率限制了微小病灶的检出能力。未来研究应聚焦三方面突破：开发环境响应型HA-FITC探针，实现肿瘤微环境（低pH、高酶活性）特异性荧光激活；深入研究其体内代谢路径与长期毒性，完善生物安全性数据；推动HA-FITC与多模态成像技术（如MRI、PET）的融合，构建多维度成像体系，实现生物过程的精准化、立体化监测，为生物医学研究与临床诊疗提供更高效的技术支撑。
