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FITC-丙酮酸 FITC-Pyruvic Acid:代谢研究与荧光示踪的创新工具

时间:2025-12-01    阅读:95    点赞:0

FITC-丙酮酸:代谢研究与荧光示踪的创新工具

一、产品概述  

FITC-丙酮酸(FITC-Pyruvic Acid)是一种将荧光素异硫氰酸酯(FITC)与丙酮酸通过化学偶联技术结合的多功能探针。其核心结构融合了丙酮酸在糖酵解、三羧酸循环等代谢途径中的关键作用,以及FITC的绿色荧光特性(激发波长490 nm,发射波长520 nm),形成兼具代谢示踪与荧光成像功能的分子工具。该产品通过优化合成工艺确保丙酮酸的生物活性与FITC荧光信号的稳定性,纯度≥95%(HPLC检测),适用于细胞代谢研究、药物递送系统开发及实时药效监测等场景。

 

二、核心特性与优势  

1. 代谢示踪与荧光成像一体化  

   丙酮酸作为糖代谢的关键中间产物,参与多种生物过程。FITC-丙酮酸通过荧光标记实现对丙酮酸在细胞内的动态追踪,例如在肿瘤细胞中,其荧光信号可直观显示丙酮酸向乳酸的转化过程,验证沃伯格效应(Warburg effect)的代谢特征。FITC的高量子产率(0.85)和光稳定性(在乙醇中测定)确保了信号的灵敏度与持久性,适用于长时间动态监测。

 

2. 高生物相容性与水溶性  

   FITC-丙酮酸采用水溶性磺酸基修饰的FITC染料,在纯水及生理缓冲液(如PBS、HEPES)中溶解性良好,避免了传统疏水性染料的聚集问题。其化学性质兼容多种实验条件,可与其他荧光探针(如Cy3、Alexa Fluor系列)联合使用,实现多色成像及多重标记分析。

 

3. 靶向标记与特异性结合  

   FITC的异硫氰酸酯基团可与生物分子中的氨基(-NH₂)发生特异性反应,形成稳定的硫脲键。在蛋白质标记中,FITC-丙酮酸可通过靶向含氨基的酶或转运蛋白(如乳酸脱氢酶、单羧酸转运蛋白MCT),实现代谢相关分子的精准定位。例如,在神经退行性疾病模型中,标记的丙酮酸探针可清晰显示神经元内丙酮酸的分布与转运路径。

 

4. 多维度研究工具  

   代谢通路解析:通过荧光信号强度变化定量分析丙酮酸在糖酵解、线粒体氧化等代谢通路中的流量,揭示肿瘤细胞或病变组织的代谢重编程机制。  

   药物筛选与评估:作为药物靶点验证工具,FITC-丙酮酸可监测化合物对丙酮酸代谢相关酶(如丙酮酸激酶、乳酸脱氢酶)的抑制效果,辅助新型抗癌药物的开发。  

   活体成像与药效监测:在小动物模型中,其绿色荧光特性可穿透皮肤及浅层组织,实时可视化药物在肿瘤微环境中的分布及代谢转化,指导靶向制剂的优化。

 

三、应用领域  

1. 肿瘤代谢研究  

   糖酵解活性评估:通过流式细胞术或共聚焦显微镜,定量检测肿瘤细胞内FITC-丙酮酸的摄取及乳酸生成量,评估糖酵解水平与肿瘤恶性程度的相关性。例如,在乳腺癌模型中,荧光信号显示高侵袭性肿瘤细胞的丙酮酸代谢显著增强。  

   耐药机制探索:追踪耐药细胞对丙酮酸的摄取差异,揭示ABC转运蛋白(如P-gp)在药物外排中的作用,为逆转耐药策略提供依据。

 

2. 神经科学与代谢疾病  

   神经元能量代谢分析:在阿尔茨海默病模型中,FITC-丙酮酸标记的探针可监测神经元内丙酮酸向乙酰辅酶A的转化,解析线粒体功能障碍与疾病进展的关联。  

   糖尿病研究:通过荧光信号评估胰岛素对肌肉细胞丙酮酸摄取的调控作用,阐明胰岛素抵抗的分子机制。

 

3. 药物递送与诊断  

   靶向纳米载体优化:与脂质体或聚合物胶束结合后,FITC-丙酮酸的荧光特性可用于监测药物载体在肿瘤组织中的蓄积及释放行为,指导靶向制剂的设计。  

   光声成像引导治疗:结合光声成像技术,FITC-丙酮酸可同时实现肿瘤定位与药物释放监测,为精准化疗提供可视化支持。

 

四、技术参数与规格  

化学性质:  

  - 分子式:C₃H₄O₃(丙酮酸) + C₂₀H₁₁N₂O₅SCl(FITC)  

  - 分子量:88.06(丙酮酸) + 389.84(FITC)  

  - 纯度:≥95%(HPLC检测)  

  - 溶解性:溶于DMSO、DMF,微溶于水(建议使用DMSO配制10 mM母液)  

荧光特性:  

  - 激发波长:490 nm  

  - 发射波长:520 nm  

  - 荧光量子产率:0.85(在乙醇中测定)  

储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融  

包装规格:1 mg、5 mg、25 mg(铝箔袋或氟化瓶封装)。

 

五、使用建议与注意事项  

1. 标记反应优化  

   偶联条件:推荐在pH 8.5的碳酸盐缓冲液中,FITC与丙酮酸的摩尔比为5:1-10:1,室温反应1-2小时。  

   纯化方法:标记后可通过凝胶过滤(如Sephadex G-25)或HPLC去除未反应的染料,推荐使用PD-10柱(GE Healthcare)进行快速纯化。

 

2. 实验设计要点  

   背景控制:设置未标记的阴性对照,排除非特异性荧光干扰。对于流式细胞术,建议使用同型对照优化补偿参数。  

   多色实验:与其他荧光探针联用时,需确保激发/发射光谱无显著重叠。例如,FITC-丙酮酸可与Cy5标记的DNA染料(激发646 nm,发射662 nm)联合用于双重标记。

 

3. 安全与储存  

   - 操作时需佩戴防护手套及护目镜,避免直接接触皮肤或黏膜。若不慎接触,立即用大量清水冲洗并就医。  

   - 溶解后的母液建议分装保存,短期(1周内)可在4℃存放,长期储存需-20℃冷冻。

 

六、行业应用案例  

1. 科研领域  

   - 某国际团队利用FITC-丙酮酸标记的纳米颗粒,结合活体成像技术揭示了肿瘤微环境中丙酮酸代谢的空间异质性,相关成果发表于《Nature Communications》。  

   - 在神经退行性疾病研究中,FITC-丙酮酸被用于追踪神经元内丙酮酸的转运路径,成功解析了帕金森病模型中能量代谢异常的动态变化。

 

2. 工业与临床转化  

   - 某生物制药公司采用FITC-丙酮酸开发了新型ADC(抗体-药物偶联物)质量控制平台,通过荧光强度定量评估药物-抗体偶联比(DAR),显著提升了生产工艺的稳定性。  

   - 在临床前研究中,FITC-丙酮酸标记的靶向肽探针被用于前列腺癌的PET/NIRF双模成像,实现了肿瘤的精准定位与分期。

 

结语  

FITC-丙酮酸凭借其代谢示踪与荧光成像的双重功能,已成为生物医学研究与转化领域的核心工具。从肿瘤代谢机制解析到药物递送系统优化,从基础研究到临床诊断,其应用场景持续拓展,为探索生命奥秘与疾病治疗提供了新的视角。随着合成技术的不断优化,FITC-丙酮酸有望在个性化医疗及新型诊疗一体化平台中发挥更大价值,推动精准医学的进一步突破。

 

(注:部分技术参数及应用案例基于行业通用数据及文献报道,具体实验结果可能因实验条件差异有所不同。) 

【星戈瑞stargraydye】以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)


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