CY2-油酸、CY3-油酸、CY5-油酸是一系列将不同荧光团（花菁染料）与油酸（一种脂肪酸）共价连接而成的荧光示踪脂肪酸类似物。
它们在脂质代谢、细胞生物学和药物递送研究中的工具。
下面将简要解析它们的特性、应用和区别。
油酸 (Oleic Acid):一种常见的单不饱和脂肪酸。参与细胞的能量供应、信号传导和膜流动性调节。
花菁染料 (Cyanine Dyes: CY2, CY3, CY5):
CY2: 发射光为绿色（~484-502 nm），分子量最小。
CY3: 发射光为橙黄色（~540-560 nm），亮度高，光稳定性好，且常用。
CY5: 发射光为红色（~638-662 nm），分子量最大，适用于需要深层组织穿透或避免自发荧光干扰的实验。
荧光标记的油酸:
将染料通过化学基团连接到油酸的羧基端。染料部分提供了一个光学信号，使得研究人员可以实时、可视地追踪油酸在细胞内的命运。
科研应用
这些探针被应用于：
1. 脂质代谢研究:
* 实时追踪脂肪酸的摄取：观察不同细胞摄取油酸的速率和效率。
* 细胞内运输与代谢：追踪油酸进入细胞后的动态过程，例如：
* 如何被激活成脂酰辅酶A（Acyl-CoA）。
* 如何被整合到脂滴（Lipid Droplets）中用于储存。
* 如何被整合到细胞膜磷脂中。
* 如何进入线粒体或过氧化物酶体进行β-氧化供能。
2. 脂滴生物学:
这些探针是脂滴的 superb 标记物。细胞孵育CY-油酸后，它会很快被酯化并并入新生的或已有的脂滴中，在荧光显微镜下呈现出明亮的、圆形的脂滴结构。
可以研究脂滴的形成、生长、融合以及分解的动态过程。
3. 多色成像与共定位研究:
同时使用CY2-油酸、CY3-油酸、CY5-油酸，或与其他细胞器标志物一起使用，可以研究脂滴与其他细胞器的相互作用。
例如，可以用CY3-油酸标记脂滴，用CY5标记某个特定蛋白（抗体），研究该蛋白与脂滴的共定位。
4. 药物筛选:
用于筛选影响脂质代谢的药物。例如，在脂肪肝疾病、肥胖症或脂质储存障碍疾病的细胞模型中，用CY-油酸处理，然后通过高通量成像分析脂滴的数量、大小和分布变化，来评估药物的疗效。
5. 膜动力学研究:
虽然不如磷脂类似物直接，但部分标记的油酸也可能被整合到膜结构中，用于研究膜流动性和微域结构。
三种染料标记的油酸的区别与选择
选择哪一种主要取决于您的实验设备和研究目的。
适用场景
CY2-油酸：需要第三通道（绿色）的多色成像实验。
CY3-油酸：绝大多数细胞成像实验的首选，特别是脂滴标记和代谢研究。
CY5-油酸：红外荧光成像和流式分析技术。
注意事项
1. 浓度优化：使用浓度过高会导致人工假象，如形成非特异性的染料聚集体或脂滴异常增大。
2. 孵育时间：根据研究目的调整时间。
* 短时间孵育（30分钟-2小时）：主要观察摄取过程和早期代谢。
* 长时间孵育（4-16小时）：油酸会充分代谢并并入脂滴，用于观察成熟的脂滴。
3. 对照实验：务必设置未处理的细胞对照，以区分特异性标记和自发荧光。
4. 溶解度：这些化合物通常是疏水的，可能需要用DMSO配制stock solution，然后用含血清的培养基稀释到工作浓度。血清中的蛋白（如BSA）会帮助其分散，模拟体内脂肪酸与 albumin 结合的状态。
5. 固定：如果需要固定细胞，通常使用4%多聚甲醛。注意固定可能会破坏一些精细的结构。
CY2/3/5-油酸是研究脂质代谢，特别是脂滴动态的科研工具。其中，CY3-油酸因其亮度和光谱特性，是大多数实验的起点。如果您需要进行多色成像或需要极低的背景，则应根据显微镜的配置和其他所用探针的光谱，选择 CY2-油酸 或 CY5-油酸。
以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考！(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)
