FITC-Streptavidin(异硫氰酸荧光素标记链霉亲和素)是将FITC荧光染料共价偶联至链霉亲和素(Streptavidin)的高性能生物探针。该产品结合了链霉亲和素对生物素(Biotin)的高亲和力与FITC的强荧光特性(Ex/Em=488/520 nm),应用于生物医学研究中的荧光检测与成像。
特性
激发波长:最大激发波长通常在 ~494 nm(蓝光)。
发射波长:最大发射波长通常在 ~518 nm(绿光)。
标记:FITC 分子上的异硫氰酸基团 (-N=C=S) 很容易与蛋白质(如链霉亲和素)上的伯氨基 (-NH2) 发生反应,形成稳定的共价键(硫脲键),从而将荧光素标记到蛋白质上。
荧光检测:使用带有适当波长滤光片(通常是蓝光激发滤片和绿光发射滤片)的荧光显微镜、流式细胞仪、荧光酶标仪或其他荧光检测设备来检测 FITC (绿色荧光) 信号。
应用领域
免疫组织化学/免疫细胞化学:在组织切片或细胞爬片上检测特定抗原。常用模式:一抗(未标记)→生物素化二抗→ FITC-Streptavidin →荧光显微镜观察 (绿光)。
流式细胞术:检测细胞表面或内部的抗原标记。常用模式:细胞 + 生物素化抗体→洗涤→FITC-Streptavidin→上机检测 (激发 488 nm 激光,检测 FITC 通道,通常是 530/30 nm 滤片)。
免疫印迹/蛋白质印迹:在膜上检测特定蛋白质条带。常用模式:膜 + 一抗 (未标记)→生物素化二抗→FITC-Streptavidin→使用荧光成像仪检测绿光信号 (灵敏度不如化学发光法常用,但可用于多色检测或避免化学发光淬灭)。
原位杂交:检测组织或细胞中的特定核酸序列 (DNA/RNA)。常用模式:生物素标记的核酸探针→与样品杂交→FITC-Streptavidin→荧光显微镜观察。
酶联免疫吸附试验:在微孔板上检测抗原或抗体。虽然 FITC 不适合同接化学发光读板机,但在荧光 ELISA 中可用 FITC-Streptavidin 检测生物素化抗体/抗原,然后用荧光酶标仪读取荧光信号。
亲和纯化/分离:将生物素标记的靶分子(如生物素化抗体)固定在固相介质(如磁珠)上链霉亲和素后,再用于特异性吸附目标分子。FITC 标记在此处通常用于标记验证或检测,而不是必需的纯化步骤。
使用说明
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融(有效期1年)。
溶解后避免光照与高温,防止荧光淬灭。
避光: FITC 易光漂白,试剂和使用中的样品需尽量避光操作和保存(用锡箔纸包裹)。
仅限科研使用,严禁用于人体。
以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)