CY7-NHS(CY7-N-羟基琥珀酰亚胺酯)是一种近红外荧光标记试剂,其活性基团(NHS酯)可与多种含伯氨基(-NH2)的分子发生共价偶联。
CY7-NHS可直接标记的分子类型
蛋白质/抗体:
反应基团:赖氨酸(Lys)ε-氨基
应用:抗体标记、荧光成像、流式细胞术
注意事项:避免过度标记(可能导致聚集或失活)
多肽:
反应基团:N端氨基或赖氨酸氨基
应用:靶向探针、药物递送系统
注意事项:优化pH(8-9)以提高反应效率
氨基化核酸:
反应基团:5'-氨基修饰的DNA/RNA
应用:荧光原位杂交(FISH)、核酸检测
注意事项:需避免RNase/DNase污染
氨基化聚合物:
反应基团:聚赖氨酸、PEI等
应用:基因转染载体、纳米颗粒修饰
注意事项:注意溶解性(DMSO vs. 水溶液)
小分子胺类:
反应基团:伯氨基(-NH₂)
应用:药物分子标记、代谢追踪
注意事项:需纯化去除游离染料
脂质体/纳米颗粒:
反应基团:表面氨基(如DSPE-PEG-NH2)
应用:活体成像、靶向递送
注意事项:控制染料密度以避免荧光猝灭
标记注意事项
pH控制:最佳pH 8-9,酸性环境(pH <7)会降低反应效率。
溶剂选择:DMSO/DMF溶解CY7-NHS。避免含氨基的缓冲液(如Tris、甘氨酸),会竞争反应。
纯化要求:使用凝胶过滤或透析去除游离染料。
不可标记的分子类型
CY7-NHS 无法直接标记以下分子(需引入氨基或使用其他交联剂):
巯基(-SH):需通过SMCC等双功能交联剂间接偶联。
羧基(-COOH):需先活化为NHS酯(如EDC/NHS处理)。
羟基(-OH)或醛基(-CHO):需特定化学反应(如点击化学)。
以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)