CY7是一种常用的近红外(NIR)荧光染料。它的激发和发射波长都在红外区,具有组织穿透性强、背景自发荧光干扰小等优点。
CY7常用的激发通道是:745 nm 至 785 nm 的激光器
具体来说,在常见的流式细胞仪、共聚焦显微镜等仪器上,需要找到能发出这个波长范围激光的通道。
相关解释与选择指南:
CY7的光谱特性:
最大激发波长(Ex Max): 通常在740 nm- 755 nm左右。
最大发射波长(Em Max): 通常在774 nm - 775 nm左右。
仪器通道匹配:
常见选择:785 nm固态激光器。这是专门为像CY7、APC-Cy7这样的远红/近红外染料设计的激光线,能激发CY7,获得最强的荧光信号。
良好选择:633 nm 或 640 nm 的氦氖激光器。虽然这不是CY7的最佳激发波长(属于非最优激发),但由于其波长与CY7的吸收谱有部分重叠,仍然可以有效地激发CY7,并且是很多配置了红激光的流式细胞仪上的标准用法。
在这种情况下,仪器的检测滤光片通常配置为长通 >670 nm 或带通 780/60 nm 左右,以收集CY7的发射光。
常见仪器上的配置示例:
流式细胞仪:
如果仪器配有 785 nm 激光,CY7通常会在这个激光器对应的检测器上检测,滤光片为e.g., 805/40 或 810/40。
如果仪器只有 633 nm / 640 nm 红色激光,CY7会在此激光器对应的检测器上检测,滤光片通常为e.g., 780/60 或 670 LP(长通)后的检测器。
荧光显微镜/共聚焦显微镜:
需要使用能发射 740 nm - 800 nm 范围激光的装置。很多高端的共聚焦显微镜会配备可调谐的白光激光器,可以很方便地调到755 nm或附近来激发CY7。
重要提示:
仪器配置:确认您的仪器配备了哪种激光器,并了解其对应的检测通道和滤光片配置。
避免交叉:在多色实验中,要注意CY7与其他染料(如APC、PerCP-Cy5.5)之间的荧光溢漏,并做好补偿调节。
以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)