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FITC-Glycocholic Acid,荧光标记甘氨胆酸之FITC仪器通道匹配

时间:2025-08-29    阅读:228    点赞:0

FITC-Glycocholic Acid是一种将荧光探针FITC与胆汁酸(甘氨胆酸)结合而成的复合物,主要用于追踪胆汁酸的摄取、转运和代谢过程,常见于细胞生物学、肝药代谢和肠肝循环等研究。

 

针对其荧光特性,以下FITC-甘氨胆酸激发通道激发和检测信息:

FITC-甘氨胆酸的适宜激发通道是:

488 nm 激光器:这是最常见激发FITC的激光线。绝大多数流式细胞仪和共聚焦显微镜都配备有这个激光器。

 

FITC的光谱特性:

最大激发波长 (Ex Max): ~ 490 nm

最大发射波长 (Em Max): ~ 520 nm (呈明亮的黄绿色荧光)

星戈瑞 

仪器通道匹配:

激发光源:488 nm 氩离子激光是激发FITC的常见激发。其波长与FITC的最大吸收峰(490 nm)非常接近,能实现高效率的激发,获得强的荧光信号。

检测滤光片:在488 nm激光激发后,需要配置相应的滤光片来检测其发射光。

通常使用 530/30 nm 或 525/40 nm 等带通滤光片来收集519 nm附近的发射光。

在流式细胞仪或显微镜的软件中,这个通道通常就直接被命名为 FITC通道。

 

其他可用的激光器:

~405 nm ( violet laser ) 或 ~440 nm 激光器也可以激发FITC,但因为远离其最佳吸收峰,激发效率会低很多,产生的荧光信号较弱。通常只在多色实验中被用作次要选择,以避免激光器间的冲突。

 

实验注意事项

使用FITC-Glycocholic Acid时,除了了解激发通道,还需注意:

光漂白 (Photobleaching):FITC是一种容易发生光漂白的染料,长时间光照后荧光信号会减弱。实验时应注意避光操作(使用避光离心管、避光孵育),并在成像时控制曝光时间。

pH敏感性:FITC的荧光强度对pH值敏感,在酸性环境中荧光会显著淬灭。而胆汁酸的转运过程可能涉及细胞内的酸性环境(如内吞体、溶酶体),这可能会影响信号检测,需要谨慎解读结果。

溶剂与浓度:确保化合物溶解在合适的溶剂中,并设置溶剂对照组,以排除溶剂本身对细胞活性或荧光背景的影响。

 

以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)

标签: FITC
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