Concanavalin A-FITC(刀豆蛋白A-荧光素异硫氰酸酯)是一种通过化学偶联将绿色荧光探针(FITC)与植物凝集素刀豆蛋白A(Con A)结合的复合物,应用于细胞生物学、糖生物学及免疫荧光检测领域。
FITC 荧光素异硫氰酸酯,绿色荧光染料(激发波长~494nm,发射波长~518nm)。通过FITC分子的异硫氰酸酯基团与Con A分子上的游离氨基反应,形成稳定的硫脲键,将荧光素共价连接到Con A上。
存储:
温度:-20℃冷藏。
严格避光: FITC 遇光易降解(光漂白)。
干燥:保持干燥,防止潮解(冻干粉易吸湿)。
稳定性:在此条件下通常可稳定保存 1-2年。
分装:可分装成单次或少量多次使用的小份,避免反复冻融导致蛋白聚集、变性或荧光淬灭。
注意事项:禁止操作,不含 Mn²⁺/Ca²⁺的缓冲液: 会使 Con A 失活。
Con A-FITC主要用于可视化、定位和定量分析细胞表面或组织内特定的糖基化结构:
活细胞/固定细胞染色:标记活细胞或固定后细胞表面的寡糖链。
荧光显微镜/共聚焦显微镜:直接观察荧光标记的Con A在细胞表面的结合分布模式。可以反映细胞膜特定糖基的整体分布和丰度。
流式细胞术:定量检测细胞群体表面Con A结合位点的表达水平。
共聚焦显微镜:观察细胞内膜性细胞器(如内质网、高尔基体)或分泌颗粒等部位的糖基化状态。
冷冻切片染色:将Con A-FITC应用于组织切片。
荧光显微成像:观察特定糖基在组织中的分布模式、强度和定位(细胞膜、胞浆、特定区域)。
多色标记:可与针对特定蛋白的抗体(用不同颜色荧光染料标记,如Cy3, Cy5标记的二抗)进行共染色,研究糖基化结构与其他分子的共定位关系。
以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)