FITC(异硫氰酸荧光素)是一种常用荧光染料,其异硫氰酸酯基(-N=C=S)可与多糖分子中的氨基(-NH₂)或羟基(-OH)在弱碱性条件下共价结合,形成稳定的硫脲键或酯键,实现多糖的荧光标记。
保存使用
温度:
短期(1周内):4℃避光保存(如棕色离心管+铝箔包裹)。
长期(数月以上):建议分装后 -20℃或-80℃冻存(避免反复冻融),冻干粉更稳定。
避光:FITC易光降解,全程使用 棕色管/黑色EP管,存放于暗处或覆铝箔。
复溶注意事项:冻存样品需室温缓慢溶解(避免高温导致FITC降解)。可轻微涡旋混匀,避免剧烈振荡产生气泡(可能淬灭荧光)。
应用场景
免疫调节机制研究:观察灵芝多糖在免疫细胞(如巨噬细胞、树突状细胞)中的摄取及亚细胞分布,研究其激活免疫应答的机制。
方法:
荧光显微镜:直接观察细胞内荧光信号,分析摄取动力学(如时间依赖性、浓度依赖性)。
流式细胞术:定量检测细胞内荧光强度,比较不同细胞类型或处理条件下的差异。
共定位实验:与溶酶体(LysoTracker)或主要组织相容性复合体(MHC)标记共染色,确认灵芝多糖的免疫激活路径。
药物递送系统开发:研究灵芝多糖作为天然载体的药物递送潜力,评估其负载药物后的释放行为及靶向性。
方法:
荧光共振能量转移(FRET):若负载药物标记另一种荧光基团(如Cy5),可通过FRET信号分析药物与载体的解离过程。
细胞摄取实验:观察GLP-FITC负载药物后进入肿瘤细胞的能力,评估效果。
以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)