FITC-Con A(荧光素异硫氰酸酯标记刀豆蛋白A)是一种通过化学偶联将荧光探针(FITC)与刀豆蛋白A(Concanavalin A, Con A)结合的复合物,应用于细胞生物学、糖生物学及免疫荧光检测领域。
荧光特性
激发波长(Ex):490 nm(蓝光)
发射波长(Em):520 nm(绿光)
荧光颜色:绿色
检测通道:FITC(流式/显微镜)
光稳定性:中等(易光漂白)
应用场景
细胞表面糖蛋白检测:Con A可特异性结合细胞表面的α-D-甘露糖和α-D-葡萄糖残基,通过荧光信号可视化糖蛋白分布(如免疫荧光实验);
细胞分选与流式细胞术:利用FITC的荧光信号,对结合Con A的细胞进行分选或定量分析;
糖生物学研究:追踪糖蛋白的合成、运输及降解过程,或研究细胞间相互作用;
药物递送研究:Con A可作为靶向载体,将FITC标记的药物或纳米颗粒递送至糖蛋白高表达的细胞。
荧光显微镜:定位糖基在细胞膜、细胞器(如内质网、高尔基体)的分布。
组织切片染色:病理组织中糖基化模式分析(需透化处理)。
糖蛋白纯化/检测:亲和层析或Western Blot糖蛋白检测(需固定化Con A)。
注意事项
pH控制:FITC偶联时需保持pH 9-10(碳酸盐缓冲液),避免酸性条件导致FITC水解(异硫氰酸酯不稳定);
温度:低温(4℃)反应可减少副反应(如FITC自聚、Con A变性);
溶剂选择:有机溶剂(DMSO、DMF)用于溶解FITC,但浓度不宜过高,以免影响Con A活性;
避光操作:FITC对光敏感,合成及纯化过程需全程避光(如用棕色瓶、铝箔包裹);
活性验证:标记后需通过凝集素活性实验(如血凝反应)确认Con A的糖结合能力未因标记而显著降低(通常标记效率<20%时活性保留较好)。
以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)