Dextran-FITC是一种荧光标记的葡聚糖衍生物,由水溶性多糖葡聚糖(Dextran)与绿色荧光标记物FITC通过化学键共价连接而成。葡聚糖(分子量通常为10kDa~2000kDa)具有良好的生物相容性和低免疫原性,用于药物载体、血管通透性研究及细胞标记;FITC(激发495nm,发射519nm)赋予其绿色荧光,便于实时追踪葡聚糖的分布与代谢。该产品适用于细胞摄取研究、血管通透性评估、靶向递送系统验证等场景。
仪器与设备
荧光显微镜:配备FITC通道(激发495nm,发射519nm)。
流式细胞仪:FITC检测通道(或通用绿色荧光通道)。
活体成像仪:适用于小鼠/大鼠的荧光成像系统(需支持FITC波长)。
离心机:用于溶液配制或细胞沉淀。
水浴锅:用于溶解干粉或控制反应温度。
注意事项
储存与稳定性
储存条件:避光、-20℃保存,避免反复冻融(建议分装后保存)。
有效期:干粉通常12个月,溶液建议现用现配(4℃保存不超过1周)。
溶解与操作
避免强酸/强碱:溶解时使用PBS(pH 7.4)或水,避免强酸(如HCl)或强碱(如NaOH)破坏FITC结构。
轻柔操作:溶解或稀释时避免剧烈涡旋或超声(可能导致FITC脱落),建议轻柔混匀。
实验优化
分子量选择:低分子量(如10kDa)易被细胞摄取,适合细胞实验;高分子量(如500kDa)血管通透性低,适合血管完整性评估。
浓度与时间:细胞摄取实验需预实验优化浓度和孵育时间;活体实验需优化剂量和成像时间点。
光谱兼容性
使用前确认仪器(显微镜、流式细胞仪、活体成像仪)的激发/发射波长范围匹配FITC(495nm激发,519nm发射)。
多色荧光标记时,避免与其他荧光探针(如Cy3、PE)的光谱重叠(可通过调整激发/发射波长或使用滤光片分离信号)。
常见问题解答
问:荧光信号弱或无信号?
答:原因:FITC脱落、浓度过低、仪器灵敏度不足。
解决方案:
确认溶解方法(避免强酸/强碱、剧烈操作);
增加浓度或延长孵育/成像时间;
检查仪器参数(如激发/发射波长、曝光时间)。
问:溶液出现沉淀?
答:原因:葡聚糖析出、FITC未完全溶解。
解决方案:
轻柔涡旋或超声(低功率)辅助溶解;
离心去除不溶杂质,取上清使用。
问:细胞摄取效率低?
答:原因:分子量过高、孵育时间不足、细胞类型不匹配。
解决方案:
选择低分子量Dextran-FITC(如40kDa);
延长孵育时间(如4h);
确认细胞类型(如巨噬细胞、内皮细胞更易摄取葡聚糖)。
以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)