FITC (Fluorescein Isothiocyanate)异硫氰酸荧光素,其异硫氰酸酯基团(-N=C=S)可以与蛋白质、多肽或其他生物分子(如胆红素)上的伯氨基(-NH₂)发生反应,形成稳定的硫脲键连接。
FITC 的激发波长峰值通常在~495 nm (蓝光),发射波长峰值在~520 nm (绿光)。
标记目的:
示踪与成像:FITC 提供的强烈绿色荧光信号,使得研究人员可以在体外(如细胞培养)或离体(如组织切片)条件下,利用荧光显微镜、共聚焦显微镜或流式细胞仪等设备,实时、可视化地追踪胆红素分子的去向。
研究胆红素代谢与转运:细胞对胆红素的摄取机制。 胆红素在细胞内的转运路径。胆红素与细胞内结合蛋白(如谷胱甘肽-S-转移酶)的相互作用。药物相互作用研究:评估其他药物是否会影响胆红素的摄取、代谢或外排。
绿色荧光:
当用适当波长的蓝光(通常用 488 nm 激光或汞灯的 FITC 滤光片组)激发时,FITC-Bilirubin 会发出明亮的绿色荧光(峰值 ~520 nm)。
这种荧光信号是检测和定位标记胆红素的基础。
注意事项:
非生理性分子:FITC-Bilirubin 是人工合成的探针,其理化性质(如大小、电荷、亲疏水性)与天然胆红素(主要与白蛋白结合或与葡萄糖醛酸结合)不完全相同。
光稳定性:FITC相对容易发生光漂白(在强光照射下荧光信号衰减),成像时需注意控制曝光时间和强度。
pH敏感性:FITC的荧光强度受 pH 值影响(在酸性环境中淬灭)。
特异性:标记反应需要优化以确保 FITC 主要连接到胆红素分子上,避免游离 FITC 或其他副产物的干扰。
FITC-Bilirubin是一种利用 FITC 的绿色荧光特性来标记胆红素的工具分子。它主要用于研究胆红素的细胞摄取、转运、代谢和外排过程,特别是在肝脏细胞和血脑屏障研究中。研究人员通过其发出的绿色荧光信号(激发~495 nm,发射~520 nm),可以在显微镜下或利用流式细胞术直观地追踪胆红素在细胞或组织中的动态行为。
以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)