CY3-NHS使用注意事项
溶解方法:Cy3-NHS为粉末状,需用无水有机溶剂(如二甲基亚砜 DMSO、二甲基甲酰胺 DMF)溶解(因 NHS 酯在水中易水解),制成储备液,避免用水或缓冲液直接溶解(会导致 NHS 酯快速水解失效)。
避光操作:Cy3对强光敏感,尤其是紫外光和绿光,溶解、反应及标记后样品均需避光(用铝箔包裹容器),成像时避免长时间曝光(防止荧光淬灭)。
防止水解:NHS 酯在水中易水解(尤其酸性或碱性条件),储备液需现配现用,避免反复冻融。
标记效率检测:通过紫外 - 可见分光光度计测定(Cy3 在 550nm 处有特征吸收峰),计算染料与生物分子的结合比(D/P 值),确保标记比例适中(过高可能导致生物分子聚集或活性降低)。
生物活性验证:标记后需验证生物分子的活性是否保留(如抗体的抗原结合能力、酶的催化活性),避免过度标记导致功能破坏。
长期储存:需在-20℃避光冷冻,用棕色瓶或铝箔严密包裹容器,置于干燥环境,并隔绝空气(如充氮气保护),避免 NHS 酯水解。
分装保存:可以购买后根据实验需求,分装为单次使用量(避免反复冻融导致 NHS 酯失效),分装后密封储存。
注意事项:解冻时需室温避光静置,避免剧烈震荡;一旦溶解于有机溶剂,需尽快使用,不可再次冷冻(有机溶剂反复冻融会破坏 Cy3 结构)。
以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证,限参考。我方仅提供相关产品,不参与保证任何实验,具体应用还需参考相关实验设计及文章!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)