FITC(异硫氰酸荧光素)与Cy3(花青素3)荧光特性的详细对比。
激发与发射光谱

关键区别:
FITC在绿色通道检测,Cy3在橙色/红色通道检测,两者光谱重叠小,适合多色标记实验(如与DAPI、Cy5联用)。
光稳定性
FITC:易光漂白(尤其在强光照射下),不适合长时间成像
Cy3:显著优于FITC,可耐受更长光照时间
应用影响:
活细胞动态追踪、高分辨率成像首选Cy3(如共聚焦、TIRF显微镜)。
环境敏感性

FITC在酸性环境(如溶酶体)或固定组织中可能失效,Cy3更适用于复杂生理环境。
标记化学
FITC:反应基团是异硫氰酸酯基(-N=C=S,与氨基反应)。
CY3:反应基团是NHS酯、马来酰亚胺等等。
Cy3衍生物选择更多,适合定点标记。
应用场景推荐
应用领域

缺点总结
FITC:pH敏感性强;易光漂白;光谱易与细胞自发荧光重叠。
Cy3:量子产率较低;需特定激光器(532/543 nm);部分批次存在聚集倾向。
如何选择?
选择FITC当:
实验环境pH稳定(≥7.4)、曝光时间短、预算有限。
选择Cy3当:
需要更高光稳定性、活细胞成像、酸性环境检测、多色实验避免串扰或需长波长激发。
以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)