Sulfo-CY3.5 NHS Ester(磺酸化 CY3.5 琥珀酰亚胺酯)是基于近红外荧光染料 CY3.5 的水溶性活性标记试剂,通过引入磺酸基团(-SO3-)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)酯基团,实现亲水性增强与氨基反应活性。
激发与发射波长
激发峰(Ex):约 591 nm(近红外可见光区,适合常规荧光显微镜激发)。
发射峰(Em):约 604 nm(橙红色荧光,与 CY3 相比红移约 10 nm,减少生物自发荧光干扰)。
光学参数
斯托克斯位移:较小,需注意激发光对发射信号的干扰,建议使用窄带滤光片。
溶剂与环境影响
水溶性:因含磺酸基(-SO₃⁻),无需有机助溶剂即可溶解于水或缓冲液(如 PBS),避免了有机溶剂对生物分子(如蛋白质)的变性作用。
pH 稳定性:在 pH 5-9 范围内光谱变化小,酸性过强(pH<4)可能导致染料结构破坏,荧光淬灭。
反应特性
Sulfo-CY3.5 NHS Ester 的反应活性依赖于 NHS 酯基团(-OCO-NHS),其核心是与含伯氨基(-NH₂)的生物分子发生共价偶联。
反应原理
NHS 酯与伯氨基在碱性条件下发生亲核取代反应,形成稳定的酰胺键(-CONH-),同时释放 N - 羟基琥珀酰亚胺(NHS)。
反应靶标
主要针对含游离伯氨基的生物分子,包括:
蛋白质(如抗体、酶):氨酸残基的侧链氨基(最常见靶标)。
多肽 / 氨基酸:末端氨基或赖氨酸残基。
胺修饰的核酸(如 5’- 胺修饰的 DNA/RNA)。
胺修饰的纳米颗粒、药物载体等。
【星戈瑞stargraydye】以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)