CY5-DBCO是结合远红/近红外荧光 (CY5) 和无铜点击化学 (DBCO-SPAAC) 的能力。选择替代品时，需根据实验的具体需求（如 光谱特性、反应基团、水溶性、成本、是否需铜催化）进行选择。
一、按反应基团分类：保留 “无铜点击化学”，更换荧光基团
不同发射波长的 DBCO 染料：
CY3-DBCO / Sulfo-CY3-DBCO：
激发/发射： ~550/570 nm (橙红色)
适用场景： 多色标记 (与 CY5 搭配)、需避开远红背景的成像。
CY7-DBCO / Sulfo-CY7-DBCO：
激发/发射： ~750/770 nm (近红外 II 区)
优势： 更深组织穿透、更低背景，适合活体成像。
其他染料-DBCO： FITC (绿色), TRITC (红色), ATTO 染料等。
二、其他无铜点击化学手柄 + CY5：
CY5-TCO：
手柄：反式环辛烯 (TCO)，与 四嗪 (Tetrazine) 发生逆电子需求 Diels-Alder 反应 (IEDDA)。
优势：反应速率 比 SPAAC 快 100-1000 倍，适合超快标记 (如活体快速靶向)。
缺点：TCO 稳定性不如 DBCO (可能异构化)，需配对四嗪化分子。
按反应类型分类：更换点击化学
铜催化点击化学 (CuAAC) + CY5：
CY5-Alkyne (末端炔烃)：
配对基团：叠氮化物 (-N₃)。
优势：通常 成本更低。
缺点：需铜催化剂 (Cu⁺)，对细胞有毒性，不适用于活细胞/活体。
适用场景：体外蛋白/核酸标记、细胞固定后标记。
CY5-Azide (叠氮)：
配对基团： 末端炔烃 (-C≡CH)。
同上，需铜催化，限制在无活体系。
四嗪连接化学 + CY5：
CY5-Tetrazine：
配对基团：TCO (见上文) 或 降冰片烯 (Norbornene)。
优势：IEDDA 反应 极快 (秒级)，适用于时间敏感的活体靶向。
缺点：四嗪不稳定，需现配现用；TCO/降冰片烯需预引入目标分子。
三、非点击化学的标记体系
生物偶联：
CY5-NHS Ester：
靶点：蛋白质的伯氨基 (-NH₂)。
特点：操作简单，但标记 特异性较低 (可能多位点修饰)。
CY5-Maleimide：
靶点：蛋白质的巯基 (-SH)。
适用场景：抗体、含半胱氨酸蛋白的特异性标记。
相关问答
Q：能否用 CY3-DBCO 完全替代 CY5-DBCO？
A：光谱不同！若实验需远红光穿透性 (如活体成像) 或多色实验中需 CY5 通道，则不可替代。
【星戈瑞stargraydye】以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考！(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)
