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CY3-OVA卵清蛋白是什么?科研怎么用?

时间:2025-07-21    阅读:259    点赞:0

CY3-OVA(Cyanine3-Ovalbumin)是一种应用于生物医学研究的荧光标记蛋白探针。

 

在科研中怎么用?

CY3-OVA的用途是可视化追踪,主要应用于免疫学、疫苗研究、细胞生物学和药物递送领域。

如:药物/载体递送系统评价:  

怎么做:将CY3-OVA装载到待测试的递送载体中(如脂质体、聚合物纳米粒、外泌体、水凝胶等)。  

检测:  

离体器官成像: 处死动物后,取主要器官(淋巴结、脾、肝、肺、肾、肿瘤等)进行荧光成像或制作切片观察,定量分析载体在靶组织和非靶组织的分布。

流式/显微镜: 分析特定器官或组织内,目标细胞(如APC, 肿瘤细胞)对载体递送的CY3-OVA的摄取效率和细胞内定位。  

免疫效果: 最终仍需检测载体递送CY3-OVA所引发的免疫应答强度,证明其优于游离抗原。

 

体外细胞实验:  

细胞类型:树突细胞、巨噬细胞等等。  

孵育条件:将CY3-OVA加入细胞培养基中,浓度和时间需要根据细胞类型和研究目的优化。必须避光操作!  

洗涤:孵育结束后,用预冷的PBS彻底洗涤细胞3-4次,去除未结合的CY3-OVA。  

检测:  

流式细胞术:直接上机分析。  

显微镜:将细胞接种在玻片或共聚焦培养皿中,孵育后洗涤、固定、封片,在荧光显微镜下观察。如需观察活细胞动态过程,则需使用共聚焦显微镜和活细胞培养系统,且不固定。  

星戈瑞 

使用注意事项:

1. 避光!避光!避光! CY3见光易淬灭。从储存、溶解、实验操作到样品保存和检测,全程需避光。  

2.分装保存:收到产品后,存储于-20℃,或根据单次用量分装冻存于-20°C,避免反复冻融降低荧光强度和活性。稀释后的溶液通常4°C短期避光保存(几天)。  

3. 浓度优化: 最佳工作浓度因细胞类型、实验目的和检测方法而异,需要预实验确定。过高浓度可能导致非特异性结合或细胞毒性。  

4.对照设置:  

未处理细胞/动物:背景荧光对照。  

游离CY3染料对照:区分是OVA被摄取还是游离染料吸附。  

未标记OVA对照:在需要检测免疫应答本身(而非追踪)时使用。  

抑制剂对照:研究特定通路时(如用细胞松弛素D抑制吞噬)。  

5.荧光淬灭:在固定和封片过程中,某些试剂可能导致荧光淬灭,需选择兼容的封片剂(如抗淬灭封片剂)。  

6.背景信号:某些组织(如肠道内容物、毛发、某些食物)可能有自发荧光,干扰检测。需仔细设置对照和门控策略(流式)。

 

【星戈瑞stargraydye】以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)

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