CY5-Asiaticoside(CY5-积雪草苷)是一种将近红外荧光染料 CY5(花青素 5) 共价连接到天然活性化合物 Asiaticoside(积雪草苷) 上形成的荧光标记探针。它在科研中主要用于可视化、追踪和定量研究积雪草苷在生物体系(细胞、组织、活体动物)中的吸收、分布、代谢、排泄(ADME)过程以及作用靶点。
优点:
深组织穿透:近红外光受生物组织吸收和散射较小,适合活体成像。
低背景干扰:生物组织在此波段的自发荧光较弱,信噪比高。
高灵敏度:可检测低丰度目标。
适用于多种成像技术:体外荧光显微镜、共聚焦显微镜、流式细胞术;体内小动物活体荧光成像系统。
连接方式:
通常通过化学合成方法,将CY5 的活性基团(如 NHS ester)连接到积雪草苷分子上的合适官能团。

科研应用(怎么用?)
细胞水平研究:
流式细胞术:定量分析细胞内荧光强度随时间的变化,计算摄取速率和效率。可结合温度抑制、内吞抑制剂研究摄取机制。
荧光显微镜/共聚焦显微镜:观察 CY5-Asiaticoside 在细胞内的实时动态分布、定位。
细胞表面结合研究:研究 CY5-Asiaticoside 是否特异性地结合于细胞膜上的特定受体。
组织切片吸收与分布:荧光显微镜/共聚焦显微镜 观察药物在皮肤各层、或其它特定组织中的渗透深度和分布情况。
使用时的注意事项
溶解度与稳定性:CY5本身疏水性较强,标记后可能影响积雪草苷的水溶性。配制溶液时可能需要使用助溶剂(如DMSO)。
对照实验:
背景对照:未加探针的细胞/动物(检测自发荧光)。
游离染料对照:使用相同浓度的游离 CY5 染料(非连接状态),排除染料本身可能产生的非特异性结合或细胞摄取。
竞争/阻断实验:若怀疑通过特定受体摄取,可用过量未标记积雪草苷预处理细胞,观察 CY5-Asiaticoside 摄取的抑制情况。
光漂白保护:CY5 对光照敏感,长时间成像时应注意使用合适的激光功率,并尽量减少曝光时间。使用抗淬灭封片剂(用于切片)。
体内成像的复杂性:体内背景荧光、组织吸收/散射、动物毛发(需剃毛)、CY5 可能的代谢解离等都会影响成像结果。需要优化成像参数(曝光时间、光圈、激发/发射滤光片)和数据分析方法。离体器官成像通常提供更可靠的组织分布定量。
【星戈瑞stargraydye】以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)