CY5-NHS ester 是一种近红外荧光标记试剂，应用于生物分子（如蛋白质、抗体、多肽、核酸）的共价标记。
CY5-NHS ester 是花青素染料 CY5（Cyanine 5） 的 N-羟基琥珀酰亚胺酯（N-Hydroxysuccinimide ester）衍生物：
CY5：发射波长在 ~670 nm 的近红外荧光染料（激发波长 ~650 nm）。
NHS ester：活化酯基团，可与生物分子的 伯氨基（-NH₂） 发生高效酰化反应形成稳定酰胺键。
反应机制
CY5-NHS ester 的活化酯基与靶分子的伯氨基（如赖氨酸ε-氨基、蛋白质N端氨基） 在弱碱性条件下反应，释放 N-羟基琥珀酰亚胺（NHS），形成稳定的 CY5-生物分子偶联物。
应用场景
蛋白质/抗体标记：用于Western blot、流式细胞术、荧光显微成像（近红外通道减少背景干扰）。
核酸标记：修饰氨基修饰的寡核苷酸（如DNA探针、siRNA），用于原位杂交或活体成像。
体内成像：近红外光穿透组织更深（5-10 mm），适用于小动物活体浅层示踪。
双/多色标记：与FITC、Cy3等染料联用（光谱不重叠），实现多目标同步检测。
注意事项
无水：NHS酯遇水迅速水解失效。
避光操作：全程在暗室/棕色管中进行。
控制温度：≤25°C（高温增加水解风险）。
避免胺污染：禁用含氨基的缓冲液（如Tris、甘氨酸）。
常见问题
标记效率低：NHS酯水解失效
生物分子聚集：染料疏水性导致沉淀
非特异性结合：过量游离染料未除净
荧光猝灭：分子内/间形成二聚体
替代材料：
磺化CY5-NHS（Sulfo-CY5-NHS）：（点击进入）
水溶性增强，可直接在水溶液中反应（避免有机溶剂损伤蛋白）。
其他近红外染料：
CY7-NHS（Em~770 nm）：穿透性更强。（点击进入）
【星戈瑞stargraydye】以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考！(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)
