FITC-乳铁蛋白是通过异硫氰酸荧光素(FITC)与乳铁蛋白(Lactoferrin)的氨基基团共价偶联而成的荧光标记物,结合了FITC的高灵敏度荧光特性与乳铁蛋白的生物学功能。应用于免疫学、细胞生物学、药物递送和微生物研究等领域。
异硫氰酸荧光素(FITC)的特性
激发/发射波长:494 nm / 518 nm(绿色荧光)
标记机制:FITC的异硫氰酸基团(-N=C=S)与乳铁蛋白的赖氨酸(Lys)残基的ε-氨基(-NH₂)共价结合,形成稳定的硫脲键。
FITC-乳铁蛋白的应用
流式细胞术:定量分析巨噬细胞、肠上皮细胞(如Caco-2)对FITC-LF的摄取效率。
共聚焦显微镜:观察LF在溶酶体、内体等细胞器中的定位(可联合LysoTracker等染料)。
竞争抑制实验:加入过量未标记LF,验证受体介导的内吞作用。
纳米载体修饰:将FITC-LF偶联到脂质体、聚合物纳米粒上,追踪其靶向递送效率。
荧光成像:小鼠灌胃FITC-LF后,观察肠道吸收及全身分布(需注意FITC的穿透性限制)。
双标记策略:FITC-LF(绿色) + Cy3-转铁蛋白(红色),研究不同铁结合蛋白的共定位。
超分辨成像:结合STORM/PALM技术,解析LF在细胞膜上的纳米级分布。
常见问题
荧光信号弱:标记率低或FITC降解。
非特异性结合:电荷吸附或过度标记。
蛋白聚集:过度标记或储存不当
其他荧光标记选择推荐:
Cy3-LF乳铁蛋白:红光(550/570 nm),穿透性略强
Cy5-LF乳铁蛋白:远红光(650/670 nm),活体适用
【星戈瑞stargraydye】以上数据均来自文献资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)