“我想了解蛋白荧光标记试剂”,“我自己有个多肽,你们可以标记吗?”“多肽怎么这么贵呀,能不能便宜点”等等等,最近小编在前端收到好多多肽、蛋白标记的询单,服务到最后被反馈报价能不能优惠点,不是小编报的高,你看看他的耗材就知道它是真的好不容易,才送到你的手上。
不管是肽还是蛋白,都没有颜色的,需要提前给多肽或者蛋白标记上荧光物质。比如上期提到的Cy系列菁染料、FITC、RB等。
花菁染料有很多,比如常用的有Cy3、Cy5、Cy5.5、Cy7等。它们都可以用来标记生物分子,用于荧光成像和其他基于荧光的生化分析。
Cy染料作为常用的近红外荧光染料在多种实验方向均有应用,尤其CY7等染料它也因其特性多应用于成像染料。那在近红外成像研究方面Cy染料(菁染料)的那些特性/优点呢??
磺化Sulfo Cy7-NHS磺酸CY7标记活性脂活化酯的水溶性极高,所以在标记反应中不需要使用有机共溶剂,特别适合标记蛋白等对有机溶剂敏感的生物分子。
Sulfo-Cy7 NHS酯是一种磺化、亲水性和高度水溶性染料。该试剂允许制备Cy7标记的生物分子,特别适用于标记脆弱的蛋白质和易变性的蛋白质。染料标记的分子可用于各种研究相关的实验。
五甲川菁染料的光稳定性介于三甲川菁染料和七甲川菁染料之间, 光照条件下容易发生光漂白,其中CY5-NHS活性酷可以与蛋白质的氨基(主要是侧链的赖氨酸残基)在温和条件下反应形成共价的蛋白质和染料的复合物。
目前文献报道的荧光探针种类有很多,而其中只有花菁类荧光团处于近红外窗口波长范围。花菁类荧光团的优势在于近红外区域(约650-900nm)的光较难被生物分子吸收,因此可以穿透组织。该区域的自荧光也较少,这有利于体内成像。
(1)荧光基团(Fluorophore):当识别基团和目标分析物相互作用时能够引起化学环境的变化。而荧光基团能将这种变化转化为仪器能够探测的信号或者是人所能感知的信号。例如:光谱变化或者颜色的改变等。
荧光探针都会包括荧光团、连接体和识别团三个部分。识别团可以选择性的与检测物结合,从而改变探针的化学环境,它决定了分子探针的选择性与特异性。荧光团是把识别团与检测物结合后,将改变的化学环境,变成我们容易看见的信息, 比如荧光产生亦或是荧光淬灭,它决定了识别的灵敏度。