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FITC/香豆素/FAM/RB/TAMRA等不同荧光修饰常见方向

时间:2022-09-21    阅读:1128    点赞:0

荧光标记所依赖的化合物称为荧光物质。荧光物质是指具有共轭双键体系化学结构的化合物,受到紫外光或蓝紫光照射时,可激发成为激发态,当从激发态恢复基态时,发出荧光。荧光标记技术指利用荧光物质共价结合或物理吸附在所要研究分子的某个基团上,利用它的荧光特性来提供被研究对象的信息。

 

以下小编简要给大家简述不同荧光修饰的应用常见方向

1、FITC修饰
异硫氰酸荧光素(FITC)具有比较高的活性,通常来说,在固相合成过程中引入该种荧光基团相对于其他荧光素要更容易,并且反应过程中不需要加入活化试剂。

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2、香豆素修饰
7-氨基-4-甲基香豆素(AMC)是一种应用较多的荧光标记试剂,例如,酶的测定、激光染料的制备等多种用途,此外,C端用香豆素修饰的泛素分子也是研究蛋白质泛素化过程的重要探针。

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与其他荧光染料不同的是,AMC修饰多肽分子是从C端进行:

(1)AMC与肽链C端第一个氨基酸反应;

(2)固相合成整条肽链(从第二个氨基酸开始),并且保留整条肽链的侧链保护基和最后一个氨基保护基;

(3)液相缩合AA-AMC与全保护的肽链;

(4)切除保护基,完成肽链的修饰。

 

3、5-FAM修饰

通常用于激光共聚焦显微镜和流式细胞技术的运用。

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4、Rhodamine B(罗丹明 B)修饰

罗丹明B是众多罗丹明染料中的一种,用于荧光测定。

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5、5-TAMRA 修饰

5-TAMRA是用于标记肽和蛋白质的橙色荧光团之一。

 

 

6、Cy染料修饰

以Cy3和Cy5为例,它是高消光系数的染料。因此,它们适用于细胞内敏感的多肽定位实验。但它们的缺点是在多肽合成的环境中非常的不稳定,因此合成的量相对低。

 


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