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[星戈瑞]荧光探针-CY3 NHS ester反应机制,Cyanine NHS合成方法

时间:2023-03-23    阅读:416    点赞:0

荧光探针-CY3 NHS ester反应机制

CY3 NHS ester是一种荧光探针,可用于荧光标记蛋白质、核酸等生物大分子。它是一种氨基酸活化剂,可以与生物大分子上的羟基、胺基等官能团发生酰胺键反应。

CY3 NHS ester在反应体系中先与碱性缓冲液反应,生成CY3 NHS离子。然后,CY3 NHS离子攻击目标生物大分子上的氨基、羟基等官能团,形成酰胺键,从而实现标记。


反应过程如下:CY3 NHS ester+碱性缓冲液→CY3 NHS离子CY3 NHS离子+生物大分子官能团→CY3-生物大分子标记产物其中,CY3 NHS ester的NHS基团与碱性缓冲液中的氢氧根离子反应,生成CY3 NHS离子,这是一个较为稳定的中间体。CY3 NHS离子的活性基团是CY3酯基,可以与生物大分子上的氨基、羟基等官能团发生酰胺键反应,从而实现标记。反应后的标记产物具有荧光特性,可以通过荧光显微镜等技术进行检测和分析。

CY3 NHS ester与生物大分子的反应机制是通过酰胺键的形成实现标记,从而实现荧光探针的应用。

 Cy3-NHS

荧光探针-CY3 NHS ester合成方法

1.准备CY3荧光染料和NHS ester。CY3荧光染料可以购买或自行合成,NHS ester可以通过将NHS和活性酯化合成剂反应得到。

2.在干燥的二甲基亚胺(DMSO)中混合CY3荧光染料和NHS ester。

3.添加二甲基氨基甲酸(DMAP)作为催化剂,加速反应速率。

4.在室温下搅拌反应混合物,反应时间一般为1-2小时。

5.使用柱层析或其他方法纯化CY3 NHS ester,去除未反应的原料和副产物。

6.用干燥的有机溶剂(如甲醇或乙醇)溶解CY3 NHS ester,制备工作浓度的荧光染料溶液。


关于CY3 NHS ester,它可以用于各种生物学和化学研究中,例如研究蛋白质交互作用和信号传导。


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Sulfo-CY5 COOH

Sulfo-CY7 COOH

Sulfo-CY7 maleimide

CY5-Hylauronic acid

CY5-NHS ester

CY3-amine

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CY3-azide

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